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人γ肽PγELISA試劑盒的操作步驟

  • 更新時間:2022-12-08      瀏覽次數(shù):979
    •    人γ肽PγELISA試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。該試劑盒主要用于科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
        
        性能特征:
        1、準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
        2、靈敏度:檢測濃度小于10pg/ml。
        3、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
        4、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
        
        操作步驟:
        1、人γ肽PγELISA試劑盒樣本加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
        2、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
        3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
        4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
        5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
        6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
        7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
        8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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